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全息不一定用来成像,还可以与光镊技术混搭

2017-05-25 10:15
kumsing
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现代光学显微技术发展迅速,超分辨荧光显微成像技术的分辨率已达到了纳米级别。但是,对于微观尺度的研究来说,除了“看得见”,还需要“摸得着”,而光镊就是那只“摸得着”微观粒子的“手”。

1.什么是光镊

一束平行激光被显微物镜聚焦后会得到一个微米尺度的光斑。物镜数值孔径越大,聚焦的光斑越小(可以达到几百纳米),其电场强度梯度越大。对于电介质微粒来说,强聚焦光斑就是一个三维光学势阱,微粒会被束缚在其势能最低处。若微粒偏离势能最低点,就会受到指向势能最低点的恢复力的作用。由激光束强聚焦形成的光斑对于电介质微粒来说就像是一个“陷阱”,粒子被捕获在其中,如果移动聚焦光斑,微粒就会跟着光斑移动。这样一个强聚焦光斑可以对微粒实施捕获、移动和旋转等微操纵,就像一把“镊子”,因而被称为光镊(Optical Tweezers)。

图1 光镊原理动画

2.光镊技术的诞生

我们知道,太阳光孕育了地球上的生命,是地球活动的能量来源。除了能量特性,光还具有动量(即力)的特性。早在17世纪初,德国天文学家Kepler就提出了光压的概念来解释彗星尾巴背离太阳的现象。到了1901年,俄国物理学家Lebedev等人首次在实验上证明了光压的存在。但是,光的力学特性应用直到激光发明后才得到实质的发展。1970年,美国Bell实验室的Ashkin等人首次在实验上利用相向传播的两束高斯光束捕获住了在水中的二氧化硅微球,证明了激光对微粒的散射力。1986年,Ashkin等人利用经高数值孔径聚焦的单束激光实现了对电介质微球的三维捕获,标志着光镊技术的诞生。

3.光镊技术的应用价值

光镊的发明为人类研究微观尺度里的相互作用、深入理解微观世界提供了强有力的工具。光镊就是微观世界中的“镊子”,它可以夹持住微粒并控制微粒移动与旋转。光镊又是不一般的“镊子”,由于其利用光去操纵微粒,具有无机械接触和低损伤的特点。而且只要选择合适的低吸收波长,特别是近红外波段,光镊对生物组织的热损伤几乎可以忽略不计,因此光镊技术非常适合生命科学领域的研究。

光镊技术自发明以来广泛用于生命科学、胶体物理、化学等研究领域,包括大分子或单细胞的力学特性研究、DNA与蛋白质分子的相互作用(图2a)、胶体粒子之间的相互作用、晶体的结晶过程控制等。光镊技术在原子物理学领域也有广泛的应用,其代表就是利用激光来捕获和冷却原子(图2b)。1997年朱棣文等人因其在激光捕获和冷却原子方面的杰出贡献被授予了诺贝尔物理学奖。


图2 光镊应用的两个例子:(a)DNA与蛋白质分子的相互作用研究;(b)原子捕获与冷却。

4.全息光镊技术

4.1 为什么研究全息光镊技术?

单光镊技术一次只能捕获和操纵一个微粒,而研究人员往往希望同时控制多个微粒。传统的方法是利用振镜扫描或者多光束耦合来产生多个光阱,但是这样产生的光阱数有限,缺乏灵活性,而且系统复杂。近年来,全息光镊(Holographic Optical Tweezers,HOT)技术备受关注。它利用空间光调制器(Spatial Light Modulator,SLM)等衍射元件调制入射光波前,在物镜焦区得到预期的光场以对微粒进行捕获与操纵。

与传统光镊技术相比较,全息光镊技术不仅可以产生任意排列分布的点光阱大阵列来同时捕获多个微粒,而且可通过计算机编程独立控制其中的每一个光阱,实现复杂的动态操纵。此外,全息光镊技术通过调制入射光波前可以产生具有特殊模式的光阱,如拉盖尔高斯光束、贝塞尔光束和艾里光束等。

目前市场上已经开始出现商品化的全息光镊操作平台,但大多价格昂贵、功能固定、不便改进。而一般实验室搭建的全息光镊系统又大多存在着系统设计冗余、光路松散、占用空间大和系统稳定性差的缺点。我们实验室设计了一套紧凑的全息光镊系统,系统所占空间只有约为45 cm×45 cm×40 cm。模块化的设计使得我系统稳定性高,兼容性好,可以很好地与荧光显微成像等技术结合。

图3 紧凑型全息光镊装置

4.2 全息光镊的特点

(1)多光阱同时捕获

通过给空间光调制器加载特定的计算全息图可以调制入射光波前,然后把单束入射光分成多束出射光,从而在物镜焦区产生任意排布的点光阱大阵列。图4所示是利用点光阱大阵列来捕获和排列多个酵母菌细胞(图4a-b)和二氧化硅小球(图4c-d)的实验结果。

图4 全息光镊按特定图案分布捕获和排布酵母菌细胞(a,b)和二氧化硅小球(c,d)。

(2) 多光阱动态微操纵

全息光镊可以独立控制每一个光阱的运动,进而控制微粒移动,实现复杂的多微粒同时动态操纵。把提前计算好的CGH图像序列加载到SLM,然后按照一定帧率刷新CGH就可以实现微粒的动态操纵,如图5是同时操纵8个二氧化硅微球分别做简谐运动和圆周运动的实验结果。

图5 全息光镊同时操纵8个直径1μm的二氧化硅小球视频

(3) 特殊模式光束微操纵

利用SLM可以调制产生拉盖尔-高斯光束、贝塞尔光束和艾里光束等特殊模式光束。特殊模式光束由于具有比较特殊的相位分布及传播特性,因此在光镊技术中应用广泛,例如利用LG光束旋转微粒研究轨道角动量的传递,利用贝塞尔光束和艾里光束输运微粒来实现微粒的分选等。图6(a)给出了几种特殊模式光束传播的光强分布示意图,左下角插图是光束的横截面强度分布。图6(b)和(c)是我们利用轴平面成像技术来直接观察特殊模式光束的微操纵过程,其中图6(b)是利用零阶贝塞尔光束同时捕获多个二氧化硅微球并将其沿轴向排列成链子形状的实验结果;图6(c)是利用艾里光束输运聚苯乙烯微球时不同时刻的实验图像叠加,由此可看到微球沿抛物线弯曲轨迹运动。

图6 (a)几种特殊模式光束传播的光强分布示意图,括号内数字表示光束的模式阶数。

(b)贝塞尔光束和(c)艾里光束微操纵实验结果。

5.结束语

我们实验室开展了多种光学捕获和微操纵技术的实验和理论研究,包括全息阵列光镊、特殊模式光学微操纵和矢量光束微操纵,还进行了光镊的应用研究,包括微粒的分选,以及细胞拉伸和凝胶的弹性模量测量等研究。我们期待与国内更多科研单位开展合作研究,将光学微操纵技术与蓬勃发展的生命科学等领域相结合,共同促进相关领域的发展。

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